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[43호]Levetiracetam EP & USP 비교 분석 !
소개
레비티라세탐 (Levetiracetam)은 에티라세탐의 S-거울상 이성질체며,
뇌전증 치료제로 국내에도 24개 제약 업체에서 75종의 제품이 유통되고 있습니다 (2020년 9월 기준).
레비티라세탐의 광학분리는 USP에서 AD-H 컬럼을 이용하게 되어 있습니다.
EP에서는 OD-H를 이용하게 되어있었으나, 최신 개정으로 [cellulose derivative of silica gel for chiral separation column]으로 되어 있어,
분석자로 하여금 cellulos가 결합되어 있는 컬럼이면, 아무것이나 괜찮은 것처럼 오인 할 수 있게 수록되어 있습니다.
본 자료에서는 레비티라세탐의 AD-H, OD-H, OJ-H의 HPLC 분석 결과를 비교하고자 합니다.
분석 조건
Column |
Chiralpak AD-H (4.6 x 250, 5) Chiralcel OD-H, OJ-H (4.6 x 250, 5) |
Mobile phase |
Hexane / IPA = 90 / 10 (v/v) |
Flow |
1.0 ml/min |
Oven Temp. |
25 ℃ |
Detection (UVD) |
210 nm |
Injection Volumn |
10 ㎕ |
결과
레비티라세탐의 분석을 위해, USP 컬럼 (AD-H), EP 컬럼 (OD-H) 그리고, OD-H와 같은 Cellulose가 실리카겔에 결합되어있는 OJ-H 컬럼을 이용했습니다.
Fig 1. Enantiomeric separation of racemic Levetiracetam on (A) Chiralcel OD-H, (B) Chiralcel OJ-H, and (C) Chiralpak AD-H columns.
EP에 수록 된 [cellulose derivative of silica gel for chiral separation column] 은 OD-H, OJ-H가 해당되지만,
OD-H와 OJ-H는 완전히 다른 분석 결과를 나타냄을 확인할 수 있습니다.
만약, OJ-H 컬럼을 사용했다면,
EP의 시스템 적합성 중 PEAK 용출 순서가 다른 점 등이 시스템 적합성에 부합되지 않기 때문에,
사용해서는 안되는 황당한 결과를 얻을 수 있습니다.
EP에는 레비티라세탐 외에도 여러가지 카이랄 물질의 분석 컬럼을 애매하게 수록하였는데,
분석자는 반드시 경계하여, 컬럼을 선정해야 할 것입니다.
Fig 2. 카이랄 컬럼의 결합 물질 차이점 비교.
Fig 2는 분석에 사용한 카이랄 컬럼의 결합 물질을 소개하였습니다.
OD-H와 OJ-H가 Celluolse 기반에 곁사슬이 다르다는 것을 확인해볼 수 있습니다.
Cellulose 기반 USP에 등재된 컬럼은
L40 (OD-H), L 70 (OC-H), L80 (OJ-H), L93 (OD-RH), L107 (OJ-RH), L119 (IC) 등 매우 다양합니다.
EP 기준에 의하면, 위 6종 컬럼 모두 해당 되므로, EP 기준 컬럼 선정 시, 반드시 분석자는 주의하여야 합니다.
참고 문헌
1. B.M. Rao, et al. A validated chiral LC method for the enantioselective analysis of Levetiracetam and its enantiomer R-alpha-ethyl-2-oxo-pyrrolidine acetamide on amylose-based stationary phase_Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis. 35 (2004) 1017–1026.